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柱色譜分離提純是根據(jù)二茂鐵和乙酰二茂鐵對(duì)硅膠吸附能力的差異而進(jìn)行分離提純。柱層析是在層析柱中裝入作為固定相的吸附劑,把試樣流經(jīng)固定相而被吸附,然后利用薄層層析中探索到的能分離組分的溶劑流經(jīng)層析柱,試樣中的各組在固定相和溶劑間重新分配,分配比大的組分先流出,分配比小的組分后流出,對(duì)于不易流出的組分可另選擇合適的溶劑再進(jìn)行洗脫,這樣就可以達(dá)到各組分的分離提純。 柱色譜(柱上層析)常用的有吸附色譜和分配色譜兩類。吸附色譜常用氧化鋁和硅膠作固定相;而分配色譜中以硅膠、硅藻土和纖維素作為支持劑,以吸收較大量的液體作固定相,而支持劑本身不起分離作用。 吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大經(jīng)過活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。當(dāng)待分離的混合物溶液流過吸附柱時(shí),各種成分同時(shí)被吸附在柱的上端。當(dāng)洗脫劑流下時(shí),由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脫的速度也不同,于是形成了不同層次,即溶質(zhì)在柱中自上而下按對(duì)吸附劑的親和力大小分別形成若干色帶,再用溶劑洗脫時(shí),已經(jīng)分開的溶質(zhì)可以從柱上分別洗出收集;或?qū)⒅桑瑪D出后按色帶分割開,再用溶劑將各色帶中的溶質(zhì)萃取出來(lái)。
柱色譜分離提純是根據(jù)二茂鐵和乙酰二茂鐵對(duì)硅膠吸附能力的差異而進(jìn)行分離提純。化合物的吸附性與它們的極性成正比,化合物極性越強(qiáng),其吸附性越強(qiáng)。由于二茂鐵的極性弱于乙酰二茂鐵,二茂鐵首先向下移動(dòng),被洗脫下來(lái)。加強(qiáng)洗脫劑的極性,乙酰二茂鐵也被洗脫下來(lái),從而將乙酰二茂鐵和二茂鐵分離開。