電鏡超薄切片檸檬酸鉛染色保存方法

天元航材化工原料廠(chǎng)家的小編今天給大家介紹下關(guān)于電鏡超薄切片檸檬酸鉛染色保存方法的相關(guān)介紹，超薄切片用于電子顯微鏡觀(guān)察。由于電子穿透組織的能力較低，用于電鏡的切片要求極薄（一般為40～50nm厚），稱(chēng)為超薄切片。隨著電子顯微鏡在生物醫(yī)學(xué)研究中的廣泛應(yīng)用，對(duì)觀(guān)察樣品制備條件的要求也越來(lái)越嚴(yán)格。由于Watson(1958)首先提出鉛化合物可以增加超薄切片細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的對(duì)比度，因此Reynolds(1963)介紹的檸檬酸鉛在國(guó)內(nèi)外多被用作常規(guī)的鉛染料。然而，多年來(lái)，超薄切片的鉛污染一直是許多實(shí)驗(yàn)室的普遍問(wèn)題。電子顯微鏡的超薄切片通常用醋酸鈾和檸檬酸鉛染色。由于液態(tài)鉛與空氣中的二氧化碳接觸，染色常會(huì)產(chǎn)生細(xì)小的碳酸鉛（黑色）沉淀，直接影響超微結(jié)構(gòu)的觀(guān)察，導(dǎo)致染色失敗。而且鉛溶液不能長(zhǎng)期存放，否則污染會(huì)更嚴(yán)重。
檸檬酸鉛：密度高，對(duì)多種組織結(jié)構(gòu)有廣泛的親和作用，特別是對(duì)改善細(xì)胞質(zhì)系統(tǒng)軟件和長(zhǎng)鏈脂肪酸化學(xué)品之間的差距，糖原不能用鋨酸染色效果染色。由于鈾和鉛具有不同的染色特性，目前切片切割廣泛采用雙向染色。即先用二氧化鈾冰醋酸染料，再用檸檬酸鉛染色劑相互填充，得到染色劑的最佳實(shí)際效果。
那么我們?cè)撊绾螌?duì)電鏡超薄切片染色液檸檬酸鉛保存的改進(jìn)以下呢
檸檬酸鉛的污染是電子顯微鏡下超薄切片染色中最令人不安的事情。由于檸檬酸鉛染料堿度高（pH值在12.0左右），在空氣中很容易與二氧化碳一起沉淀出碳酸鉛。由于沉淀，鉛顆粒出現(xiàn)在標(biāo)本上，鉛顆粒覆蓋了標(biāo)本的組織結(jié)構(gòu)。它也與細(xì)胞顆粒成分混淆。因此，為獲得滿(mǎn)意的染色效果，檸檬酸鉛染料在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中應(yīng)盡量減少與空氣的接觸。檸檬酸鉛染料現(xiàn)在通常儲(chǔ)存在溶液瓶中，在染色過(guò)程中用移液管吸出。
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